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超高效液相進樣器故障知多少?

超高效液相進樣器故障知多少?
超高效液相進樣器分為FTN與FL兩類。H-Class與部分I-Class儀器使用FTN進樣器,經典UPLC和部分I-Class儀器使用FL進樣器。
FL進樣器
FL全稱為Fixed Loop,即固定定量環型。它有不充滿定量環(使用針溢出,默認進樣模式)、不充滿定量環和充滿定量環3種進樣模式。根據定量環體積差異,每種模式均有各自推薦的進樣體積范圍。
三種進樣方式在不同定量環下推薦的進樣體積范圍表:
定量環體積 不充滿定量環(使用針溢出)模式 (μL) 不充滿定量環模式 (μL) 充滿定量環模式 (μL)

 

 


建議按照推薦表使用,否則峰面積重現性可能會達不到理想狀態。

FL與FTN工作原理不同,其樣品流路處于低壓體系中。


為止擴散效應,吸樣前會先吸取小段空氣,吸樣后再吸取一段空氣,樣品兩端的氣泡將樣品與針內溶劑(弱洗液)進行隔離。完成上述步驟后進樣針進入清洗臺密封圈,樣品流路形成密閉環路,弱洗溶液自下而上推動液流產生約150 psi壓力將氣泡壓縮并推動樣品至六通閥。因此,環路密閉與充滿液體是進樣器正常工作的前提。

若保留時間穩定
峰面積重現性差的原因是定量不準。樣品量不應過滿,瓶內負壓導致吸樣不準,一般建議樣品占樣品瓶的2/3。其次,清除溶劑充足的前提下,灌注注射20-30個來回,保注射器內無氣泡。

若保留時間不佳
當保留時間與峰面積重現性都差,至不出峰時,可先執行泵頭滲漏測試(Leak Test)泵的影響,注意截止點選擇“排放閥(Vent Valve)”。

日常使用中,FL常見的報錯就是”樣品壓力低”(Sample Pressure Low),即無法壓縮產生約150 psi的壓力。由進樣工作原理我們容易找到可能的故障原因:1)弱洗注射器未充滿液體
2)進樣針彎折
3)密封圈磨損。
針對上述常見問題我們建議用戶:
1)使用前充灌注注射器,保充滿液體。
2)使用預開口進樣瓶,針扎彎
3)清洗溶劑免添加緩沖鹽,鹽析磨損密封圈。

1)針與底座內的針密封均屬于易損易耗件,建議定期換。
2)強洗溶劑一般使用高比例的有機相。
3)弱洗溶劑一般使用高比例的水,成分與流動相初始比例接近,否則可能會導致峰前延。
4)清洗溶劑要求可以溶解樣品且沒有鹽,否則會在針外壁形成鹽析,磨損針密封,縮短其壽命。
5)長時間不使用儀器,再次啟用應充分灌注系統。

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